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胞株移植瘤模型(cell derived xenograft, CDX),即將體外傳代培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞接種至免疫缺陷小鼠，也就是我們平時(shí)所說(shuō)的裸鼠成瘤。裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)，即在裸鼠皮下注入腫瘤細(xì)胞，觀察腫瘤的形成、發(fā)展及抗腫瘤藥物的效果。

1.動(dòng)物選擇

一般選擇4-6周齡Nude裸鼠，需要提前到SPF環(huán)境中適應(yīng)1周。

2.接種部位與接種細(xì)胞量

接種部位常為皮下，靜脈或原位；細(xì)胞量一般是5*106個(gè)/200ul，但是不同的細(xì)胞系的接種量略有差別。

3.成瘤時(shí)間

皮下接種的細(xì)胞一般會(huì)在1-2周成瘤，一般不會(huì)超過(guò)1個(gè)月；尾靜脈和腹腔接種的細(xì)胞一般也是1周左右，需要密切觀察動(dòng)物的體重與狀態(tài)進(jìn)行判斷。

• 為什么腫瘤不長(zhǎng)？

如果細(xì)胞接種后超過(guò)預(yù)期的觀察時(shí)間仍未成瘤，需要從以下方面進(jìn)行排查原因：

一是細(xì)胞活力，細(xì)胞活力是影響腫瘤形成的重要原因，活力不夠不能成瘤，因此細(xì)胞消化下來(lái)PBS清洗后要盡快接種；

二是動(dòng)物選擇，選擇的裸鼠周齡不宜過(guò)大，否則也會(huì)增大成瘤難度(如果還未成瘤建議更換缺陷程度更高的Nod-scid小鼠、NOG小鼠);

三是飼養(yǎng)環(huán)境，環(huán)境影響動(dòng)物狀態(tài)，狀態(tài)差的鼠容易發(fā)生死亡，不易成瘤。

• 為什么瘤子長(zhǎng)起來(lái)又消失？

很可能開始我們觀察到的腫瘤是炎癥反應(yīng)，到后來(lái)腫瘤細(xì)胞被小鼠自身吸收，需要繼續(xù)觀察腫瘤細(xì)胞吸收之后是否還能長(zhǎng)出來(lái)，長(zhǎng)不出來(lái)建議分析上述原因重新實(shí)驗(yàn)。

• 需要觀察什么？

在腫瘤長(zhǎng)出后，需要密切觀察動(dòng)物的狀態(tài)、體重和瘤體積。瘤體積的測(cè)量一般采用公式V=ab2/2進(jìn)行計(jì)算。動(dòng)物體重的增加或者減少量，直接反應(yīng)著動(dòng)物的整體狀態(tài)，評(píng)估腫瘤是否出現(xiàn)轉(zhuǎn)移等。

裸鼠成瘤狀態(tài)和瘤體積

瘤體積測(cè)量

瘤體積觀察

• 如何判斷腫瘤是否出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移？

第一：病理剖檢。如果腫瘤出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移，在肝臟或者腎臟等組織上肉眼可見明顯轉(zhuǎn)移灶。

病理剖檢

第二：小動(dòng)物活體成像。如果接種的腫瘤細(xì)胞帶有熒光標(biāo)簽或者熒光素酶，可以借助小動(dòng)物活體成像儀進(jìn)行觀察瘤細(xì)胞的大小和轉(zhuǎn)移情況。

活體成像

第三：小動(dòng)物核磁。小動(dòng)物核磁技術(shù)可以更明細(xì)那地觀察到腫瘤細(xì)胞在肝臟，肺臟或者其他器官的轉(zhuǎn)移情況

核磁檢測(cè)

• 哪些細(xì)胞能夠成瘤？

目前驗(yàn)證過(guò)的細(xì)胞有HCT116、HePG2、A549、MKN45、AGS、 CT26 、NCI-H460、HT-29、SK-OV-3、MCF-7、B16、SGC7901、BEL-7402、BGC-823、PC-12等(待更新)。