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【實(shí)驗(yàn)原理】

細(xì)胞遷移即細(xì)胞劃痕法，是測定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法，類似體外傷口愈合模型。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其他硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時(shí)間，取出細(xì)胞培養(yǎng)板，觀察周邊細(xì)胞是否生長至中央劃痕區(qū)，以此判斷細(xì)胞的生長遷移能力，實(shí)驗(yàn)通常需設(shè)定正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等組別，通過不同分組之間的細(xì)胞對(duì)于劃痕區(qū)的修復(fù)能力，可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力。當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時(shí)，在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個(gè)空白區(qū)域，稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細(xì)胞會(huì)逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。

【實(shí)驗(yàn)步驟】

1、培養(yǎng)板接種細(xì)胞之前先用marker筆在12孔板背面畫橫線標(biāo)記（方便拍照時(shí)定位同一個(gè)視野）。

2、細(xì)胞消化后接入12孔板，數(shù)量以貼壁后鋪滿板底為宜（數(shù)量少時(shí)可培養(yǎng)一段時(shí)間至鋪滿板底）。

3、細(xì)胞鋪滿板底后，用1ml槍頭垂直于孔板制造細(xì)胞劃痕，盡量保證各個(gè)劃痕寬度一致。（人工槍頭制造劃痕難以保證劃痕寬度的一致性，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這也是該方法最大的缺陷）。

4、吸去細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS沖洗孔板三次，洗去劃痕產(chǎn)生的細(xì)胞碎片。

5、加入無血清培養(yǎng)基，拍照記錄。

6、將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每隔4-6小時(shí)取出拍照。

7、根據(jù)收集圖片數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

【常見問題和注意事項(xiàng)】

在進(jìn)行細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：

（1）實(shí)驗(yàn)前應(yīng)充分了解所選用的方法和實(shí)驗(yàn)步驟，避免操作不當(dāng)或誤操作導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。

（2）實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意細(xì)胞的狀態(tài)和培養(yǎng)條件，如培養(yǎng)基的溫度、濕度和pH值等。

（3）實(shí)驗(yàn)中應(yīng)遵循安全操作規(guī)程，如佩戴手套和口罩等。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)及時(shí)清理實(shí)驗(yàn)器材和廢棄物，避免對(duì)環(huán)境造成污染。

【交付標(biāo)準(zhǔn)】

1.  實(shí)驗(yàn)報(bào)告 

2. 真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3. 原始圖片

4. 實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)

5. 剩余物料在周期內(nèi)可返還（超過周期，不予返還）

康旭禾生物提供包括動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、分子實(shí)驗(yàn)、病理實(shí)驗(yàn)、流式檢測實(shí)驗(yàn)及論文翻譯、潤色、投稿輔助等相關(guān)的各項(xiàng)服務(wù)。

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