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"細胞-細胞間交互"三種常見作用方式和研究方法盤點，還不趕快收藏！

以外泌體（或者胞外囊泡）及其成分（如RNA、脂質(zhì)和蛋白）、線粒體轉(zhuǎn)移（比如隧道納米管介導的）、配體-受體（比如膜配體、分泌性配體以及膜受體）為代表的“細胞-細胞間通訊（Cell-Cell Communication，CCC）”是很多研究團隊關注的主題，也是這幾年國自然項目和高分文章經(jīng)常關注的領域。今天來盤點這三種作用方式的研究方法。 01外泌體介導的細胞間通訊外泌體是細胞分泌的納米級囊泡，攜帶蛋白質(zhì)、RNA等生物分子，通過與受體細胞融合或被內(nèi)吞，傳遞信號調(diào)節(jié)其功能。研 究 方 法（1）外…

WB條帶出現(xiàn)各種狀況? 原因分析和解決方法在這里！

Western Blot雖是實驗室最常用的蛋白分析技術(shù)，但是由于它步驟繁瑣、操作流程長、影響因素多，所以，導致我們在做實驗時會遇到各式各樣的問題。今天我們總結(jié)了一些WB實驗中經(jīng)常遇到的各種“奇葩”條帶問題，并為你推薦了常用的解決方法，希望對大家有所幫助。一、目標條帶沒有信號原因分析： 樣品中可能含有蛋白酶，使蛋白樣品分解成小分子。解決方法： 添加蛋白酶抑制劑。原因分析： 目標蛋白濃度過低（低于檢測下線）。力 解決方法：加大上樣量或提高目標蛋白濃度。 原因分析：…

動物實驗 | 裸鼠成瘤實驗反反復復？速看這個裸鼠成瘤小技巧，學會不再是難題！

裸鼠，也被稱為無胸腺裸鼠，是一種先天性胸腺缺陷的突變小鼠，其形成源于第VIII連鎖群內(nèi)裸體位點基因的純合。裸鼠在科學研究中展現(xiàn)出巨大的潛力，這主要歸功于其nu基因獨特的遺傳特性。經(jīng)過全球?qū)嶒瀯游镞z傳育種學家的不懈努力，nu基因已被成功導入不同近交系動物中，從而創(chuàng)建了一系列動物模型。僅小鼠模型一種，就已建立了二十余種近交系裸鼠。這些裸鼠具有不同的遺傳背景和nu基因的遺傳特性，為醫(yī)學生物學研究者提供了一種極其寶貴的試驗材料。本文將重點探討裸鼠的成瘤實驗方法。?！?/p>

流式細胞術(shù) ：當代最先進的細胞定量分析技術(shù)

流式細胞術(shù) (Flow Cytometry, FCM) 是一種在液流中快速檢測細胞特性的技術(shù)，是當代最先進的細胞定量分析技術(shù)之一。它通過將單個細胞與特異性抗體結(jié)合，對細胞進行多參數(shù)定量分析，包括細胞表面標記、細胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達、細胞周期、DNA含量等。流式細胞術(shù)具有高通量、高靈敏度、高特異性等優(yōu)點，廣泛應用于免疫學、血液學、腫瘤學等領域。01流式細胞術(shù)原理一、分析型流式細胞儀檢測原理將待測樣品制成單細胞懸液，在鞘液的包裹下進入流式細胞儀內(nèi)的檢測區(qū)域，細胞在激光的照射下會發(fā)生散…

qPCR原理雖懂，但數(shù)據(jù)難分析，你真的會設計qPCR實驗方案嗎？

一、qPCR 實驗前期籌備（一）RNA模板要求實驗啟動前，需確保RNA模板的純度、濃度及完整性均符合標準，方可推進后續(xù)步驟。具體要求如下：①RNA需保持一級結(jié)構(gòu)完好無損。②高純度：無DNA、游離核苷酸等核酸雜質(zhì)；無酶抑制性有機溶劑、金屬離子及蛋白質(zhì)、多糖、脂類等污染物。③足夠濃度：需滿足反轉(zhuǎn)錄實驗的基本需求。（二）qPCR引物設計規(guī)范引物建議長度介于18~30個堿基；GC含量應控制在40%~60%之間；設計時應跨越內(nèi)含子，避免內(nèi)部出現(xiàn)互補序列。通常，引物終濃度設為0.2μM效果較佳；若…

國自然實驗外包：有什么好處，選擇與注意事項

現(xiàn)如今，眾多科研人員已經(jīng)認同實驗外包這個行業(yè)，并融入其中，是國家鼓勵資源合理利用的很好方向。國自然實驗外包：有什么好處，選擇與注意事項。一般事先跟你講實驗風險的，都是比較靠譜的公司，因為這些公司都曾經(jīng)遇到過很多問題，知道你的實驗哪里可能出現(xiàn)問題。如果滿嘴跑火車，說實驗肯定可以做好，這樣的公司可能就是皮包公司，因為他不知道科研不是絕對的，不知道哪里可能出現(xiàn)問題。一定要與管實驗的技術(shù)聯(lián)系上，銷售員、業(yè)務代表等都是不做實驗的，實驗做得好不好，是否及時都…

實驗動物（小鼠與大鼠）的操作指南！

性別區(qū)分在實驗操作中，準確區(qū)分小鼠和大鼠的性別至關重要。主要依據(jù)以下特征進行判斷：1. 生殖器與肛門的距離：雄性小鼠和大鼠的生殖器與肛門距離較遠，而雌性則較近。這一特征在幼齡仔鼠中尤為明顯，因為此時它們的外生殖器尚未成熟。2. 毛發(fā)覆蓋情況：雄性小鼠和大鼠在生殖器與肛門之間通常有毛發(fā)生長，形成一條明顯的毛帶；而雌性則無毛，呈現(xiàn)一條清晰的縱溝。3. 乳頭的明顯程度：雌性小鼠和大鼠的乳頭相較于雄性更為突出和明顯。4. 生殖器官特征：雄性陰莖朝向頭部方向突出，可通…

細胞實驗干貨 | 常用的細胞活性檢測方法有哪些？

在細胞實驗研究中，驗證細胞活性是至關重要的環(huán)節(jié)，它關乎著細胞在特定條件下（例如藥物處理、放射性或紫外線照射、培養(yǎng)條件調(diào)整等）的生長狀態(tài)。細胞活性不僅是評估細胞健康的關鍵指標，也是眾多科研活動的基石。為此，活細胞分析技術(shù)日益凸顯其重要性。細胞活性的檢測方法眾多，其中包括臺盼藍染色法、熒光染色法、克?。洌┬纬煞āTP含量測定法以及比色法等。以下是對幾種常用方法的詳細介紹：No.1染色計數(shù)法01化學染色法 化學染色法中的染色計數(shù)法是細胞培養(yǎng)實驗中用于檢查細…

實驗動物知識 | 為什么6-8周的小鼠更受歡迎？

為何6-8周齡小鼠成為實驗首選？做過小鼠實驗的同學們或許都有這樣的疑惑......以下是小鼠出生后至14天的日形態(tài)變化概覽，可見小鼠驚人的生長速度，僅兩周（14天）便已初具形態(tài)。與人類相比，小鼠的壽命僅為約24個月，相當于人類的全球平均壽命80歲。通過換算，我們得出小鼠生活1天約等于人類40天，即人類1年約等于小鼠9.125天（計算公式：(80歲×365天) ÷ (2年×365天)）。但需注意，小鼠與人類的成熟及衰老速率并不成線性比例，因此這種換算僅為大致對應，具體年齡關系更為復雜（參考…

我?guī)熃阋荒?篇SCI，全靠這20個“寶藏網(wǎng)站”，太實用了

這20個寶藏網(wǎng)站，科研路上必備！精心篩選自100個科研資源，涵蓋SCI文獻檢索、高效閱讀、論文撰寫、科研繪圖等，讓你一旦接觸便難以割舍，科研之旅因此更加順暢。請耐心閱讀，尤其是末尾6款科研繪圖神器，絕對不容錯過。（閱讀完畢別忘了收藏點贊哦，避免未來迷失方向）一、文獻檢索篇01 PubMed鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/由美國國立醫(yī)學圖書館NCBI打造，生物醫(yī)學領域權(quán)威檢索系統(tǒng)，收錄自1966年起，70余國4000余種期刊文獻，科研人必備。搭配Scholarscope、EasyPubMed等插…

細胞實驗 | 細胞瞬時轉(zhuǎn)染操作步驟及影響因素

細胞瞬時轉(zhuǎn)染是一種常用的實驗技術(shù)，用于將外源DNA或RNA導入細胞內(nèi)，從而研究基因的表達、功能和調(diào)控機制。以下是細胞瞬時轉(zhuǎn)染的一般步驟和注意事項。一、細胞瞬時轉(zhuǎn)染的一般步驟01細胞培養(yǎng) ? 提前一天鋪板，確保細胞均勻分布。轉(zhuǎn)染前將細胞培養(yǎng)至70-80%的密度，以保證細胞處于活躍的生長狀態(tài)。02轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒準備 ? 根據(jù)轉(zhuǎn)染試劑的說明書準備轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒DNA。轉(zhuǎn)染試劑的用量通常根據(jù)細胞類型和轉(zhuǎn)染效率來確定，一般為2-10μL/孔（對于24孔板）。質(zhì)粒DNA的用量通常為…

免疫熒光染色之抗體挑選全攻略

免疫熒光染色技術(shù)依賴于抗原抗體相互作用的極高特異性。通過將不影響抗原抗體功能的熒光染料標記在抗體或抗原上，當標記的抗體與其對應的抗原特異性結(jié)合時，可在熒光顯微鏡下觀測到一種特異的熒光信號，從而判定抗原的存在、散布和位置。今天，小編將與大家探討免疫熒光染色中抗體的選擇方法，希望能對大家有所幫助。免疫熒光染色一抗的挑選①依據(jù)樣本挑選一抗一抗的物種來源應盡量避免與檢測樣本的物種相同，以防止二抗與樣本內(nèi)生的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應。例如，若檢測的是小鼠樣本…

動物實驗模型 | 糖尿病動物模型方法大匯總

糖尿?。╠iabetes mellitus, DM）已對全球人類健康構(gòu)成重大威脅。DM及其并發(fā)癥不僅顯著降低患者生活質(zhì)量，還是導致殘疾和死亡的關鍵因素。因此，構(gòu)建恰當?shù)奶悄虿游锬Ｐ?，以深入探究DM及其并發(fā)癥的發(fā)病機理，顯得至關重要。當前，制備DM動物模型的主要方法包括：胰腺切除術(shù)、化學藥物誘導、利用自發(fā)性糖尿病動物及轉(zhuǎn)基因技術(shù)等。一、胰腺切除法制備DM模型常選用狗、貓及大鼠等動物，通過全部或近乎全部切除其胰腺（同時保留胰十二指腸動脈吻合弓）。若實驗動物連續(xù)兩日血糖濃度超過1…

技術(shù)貼 |畢業(yè)論文寫作的方法與技巧

快畢業(yè)啦?。?！大家論文都寫了嗎？科研論文是反映科研成果和科研能力的一類學術(shù)性文章。從研究背景對象，到提出問題、研究方法、得出的結(jié)論，以及作者綜合實驗數(shù)據(jù)和其他資料分析得出的新的見解。No.1寫作步驟01 前期準備 （1）收集和篩選相關資料。要對閱讀的文獻進行區(qū)分，分為需要精讀和泛讀的文章。與自己研究主題密切相關的文獻應當反復仔細閱讀；與研究主題關聯(lián)程度小的文章則彩英瀏覽和區(qū)別閱讀的方法。還需注意年代，一般先了解3~5年內(nèi)的文獻。（2）充分了解相關研究背景后，根…

當審稿人要求補充實驗，我們應該怎么辦？

在SCI論文的評審流程中，審稿人提議增添實驗數(shù)據(jù)是屢見不鮮的環(huán)節(jié)。面對這一情形，作者往往面臨兩種策略：實施額外實驗或維持原狀。這兩種路徑各有其利弊，需依據(jù)實驗的可行性、研究的核心目標及論文的整體布局來謹慎抉擇。01選擇實施額外實驗當審稿人建議增加實驗時，其初衷往往在于通過更詳盡的數(shù)據(jù)支撐或?qū)嶒烌炞C來提升研究的精確度和說服力。若你傾向于采納此建議，需考量以下幾個維度： ? 實驗結(jié)果的預期價值：額外實驗的結(jié)果充滿未知，但理想狀況下，它能強化原有研究結(jié)論，為…

穩(wěn)定細胞株篩選---抗生素如何選？

在生物醫(yī)藥領域，基因轉(zhuǎn)染是一種常見的實驗技術(shù)，用于將外源基因?qū)爰毎?。然而，要想成功地進行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染并篩選出陽性細胞株，選擇合適的篩選抗生素至關重要。本文將詳細介紹如何選擇穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的篩選抗生素。通常構(gòu)建的載體上有兩個抗性基因，如，氨芐青霉素（Amp）和、新霉素抗性基因(neo)。那么建立穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系時該用哪種抗生素來篩細胞呢？很多真核表達質(zhì)粒上都有兩個抗性基因，但一般其中只有一個抗性可以用來篩細胞。其中氨芐青霉素對細胞是沒有篩選作用的，這是用于構(gòu)建克隆時篩…

【科研干貨】各類體外細胞實驗合集詳解！

體外細胞實驗是我們開展課題研究及進行生物醫(yī)藥醫(yī)學研究非常重要的途徑。今天整理了多種體外細胞實驗的干貨共大家學習和參考：MPC5足細胞缺氧模型、脊索樣細胞誘導分化成髓核樣細胞、人誘導多功能干細胞(hiPSC)誘導分化成脊索樣細胞、大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞成脂誘導模型、3T3-L1細胞成脂誘導模型、乳鼠二型肺泡上皮細胞(AECII)分離提取。LPS誘導細胞炎癥模型1. 實驗背景脂多糖(Lipopolysaccharide)(英文簡寫LPS)是革蘭氏陰性細菌細胞壁外壁的組成成分，是由脂質(zhì)和多糖構(gòu)成的物質(zhì)(糖脂質(zhì)…

HE染色過程中常見問題分析及解決對策

蘇木精-伊紅染色法（HE染色法），作為石蠟切片技術(shù)中的經(jīng)典染色方法，廣泛應用于組織學、胚胎學及病理學的教學與科研中。該方法利用堿性的蘇木精使細胞核及胞質(zhì)核酸呈現(xiàn)紫藍色，而酸性的伊紅則讓細胞質(zhì)與細胞外基質(zhì)染上紅色。常見問題及解決方案一、著色異常（過深或過淺）著色不當常因染色時間控制不當所致。HE染色需借助鏡檢來精確控制時間，預實驗可幫助確定最佳染色時長。通常，新鮮蘇木素的染色時間約為1-3分鐘，分化時間亦需適中，過度分化后可通過水洗并復染蘇木素來調(diào)整。二、…

做動物實驗，我們要分幾組？每組要幾只動物？怎么分配動物？一文全解答！

許多剛開始接觸動物實驗的小伙伴可能都會有點迷茫，不知道怎么給實驗動物分組，要分幾組、每組要幾只動物，怎么分配。別擔心，今天的文章就來給你一一解答。我們要分幾組？做動物實驗時，我們會設置不同的實驗小組。怎么分組、每組多少動物，這些都直接影響到實驗結(jié)果的可信度和統(tǒng)計分析。所以，設置實驗動物分組是非常重要的一步。一般來說，我們可以分為自身對照組、平行對照組。平行對照組又可以細分為正對照組和負對照組（也就是空白對照組）。自身對照組：就是比較動物實驗前后的…

2025 國自然：最具潛力科研熱點評選——獨木橋太難擠，另辟蹊徑也不錯

眾所周知，國自然看重創(chuàng)新，因此那些引領潮流、極具創(chuàng)新性的前沿項目更能吸引研究者的目光。然而有一些研究方向雖然不是最炙手可熱的焦點，卻蘊含著巨大潛力，默默貢獻著重要價值，有著深厚的科學基礎和廣闊的應用前景。這些熱點可能涉及細胞層面的精細分析、疾病發(fā)生機制的深入研究、新技術(shù)在醫(yī)學中的應用等多個方面。它們有望為解決當前醫(yī)學難題提供新的思路和方法，推動醫(yī)學科研不斷向前發(fā)展。通過對這些潛力熱點的評選和分析，我們可以更好地把握醫(yī)學科研的未來趨勢，為科研工作者…