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性別區(qū)分

在實驗操作中，準確區(qū)分小鼠和大鼠的性別至關重要。主要依據(jù)以下特征進行判斷：

1. 生殖器與肛門的距離：雄性小鼠和大鼠的生殖器與肛門距離較遠，而雌性則較近。這一特征在幼齡仔鼠中尤為明顯，因為此時它們的外生殖器尚未成熟。

2. 毛發(fā)覆蓋情況：雄性小鼠和大鼠在生殖器與肛門之間通常有毛發(fā)生長，形成一條明顯的毛帶；而雌性則無毛，呈現(xiàn)一條清晰的縱溝。

3. 乳頭的明顯程度：雌性小鼠和大鼠的乳頭相較于雄性更為突出和明顯。

4. 生殖器官特征：雄性陰莖朝向頭部方向突出，可通過輕輕擠壓包皮使其露出；雌性則可見閉合的陰道口，擠壓時亦可張開。

5. 外觀差異：在某些情況下，雄鼠可能體型稍大于雌鼠，但這一特征并非絕對，還受到品種、年齡和營養(yǎng)狀況等多種因素的影響。

對于新生仔鼠和成年鼠的性別區(qū)分，可分別參考以下建議：

① 新生仔鼠：主要依據(jù)外生殖器與肛門之間的距離進行判斷，距離近者為雌性，遠者為雄性。

② 成年鼠：雄性陰囊明顯可見；雌性陰道開口清晰，且乳頭明顯。

編號方法

為確保實驗數(shù)據(jù)的準確性，對小鼠和大鼠進行編號是必要的。常用的編號方法包括染色法、耳孔法和剪趾法等。

1. 染色法：使用毛筆或棉簽蘸取不同顏色的化學藥品（如苦味酸或中性紅）涂染在小鼠特定部位的毛發(fā)上。編號次序遵循九分法原則，即先左后右、由前至后。此方法適用于短期實驗，因染料易褪色。

2. 耳孔法：使用專用打孔器在小鼠耳朵上打孔或剪出不同的缺口，通過位置和孔數(shù)進行標記。一般右耳表示個位數(shù)，左耳表示十位數(shù)。對于黑色或棕色小鼠及裸鼠，可采用特殊編號方法。此方法同樣適用于短期實驗，且需確保編號不對動物生理或?qū)嶒灧磻a(chǎn)生影響。

3. 剪趾法：根據(jù)對新生小鼠前肢4趾和后肢5趾的切斷位置進行編號。應切斷一段趾骨以確保編號清晰持久。此方法常用于出生7天內(nèi)的小鼠，并需在小仔5-7日齡內(nèi)進行斷趾。

抓拿與固定

正確的抓拿與固定方法是確保實驗順利進行的關鍵。

1. 小鼠：習慣用右手者，用右手抓住小鼠尾部中部提起，放在鼠籠鐵紗網(wǎng)上或粗糙物上。待小鼠向前掙脫時，用左手拇指和食指抓住其頸部皮膚，小指和掌部夾住尾部?？粘龅挠沂诌M行后續(xù)實驗。習慣用左手者則相反操作。注意避免抓拿尾尖以防斷裂。

2. 大鼠：習慣用右手者，戴上防護手套后，用右手抓住大鼠尾巴中部提起，左手按住背部皮膚?？墒褂檬中g(shù)臺固定大鼠四肢?？粘龅挠沂诌M行后續(xù)實驗。習慣用左手者則相反操作。注意大鼠門齒較長，抓取時應避免被咬傷。

采血方法

根據(jù)實驗需求和動物福利原則選擇合適的采血方法至關重要。以下以小鼠和大鼠為例介紹幾種常用的采血方法：

1. 尾尖采血：將小鼠固定并暴露尾巴，浸泡在溫水中或擦拭酒精使血管充盈。用無菌手術(shù)刀快速剪去尾尖1-2mm，血液自然流出。此方法簡便易行，適用于多次少量采血。

2. 摘眼球采血：抓取小鼠頸部頭皮并固定尾巴，輕壓眼部皮膚使眼球充血突出。剪去胡須后，用眼科彎鑷夾取眼球并快速摘取，使血液流入EP管中。此方法適用于需要大量血液樣本的實驗。

3. 眼眶靜脈叢采血：適用于多次重復采血。無需麻醉，但需注意不能采集到無菌血樣。采血后需給予組織修復時間。

4. 心臟采血：將小鼠麻醉后仰臥固定于動物臺上，剪去胸前區(qū)被毛并消毒皮膚。使用注射器在左側(cè)第3-4肋間心搏動最強處進針刺入心臟獲取血液樣本。此方法較為復雜且對動物傷害較大。

5. 頸靜脈采血：無需麻醉，直接從穿刺點進針采集血液。要求操作者技術(shù)嫻熟且需確保動物固定良好以避免掙扎。

6. 隱靜脈采血：常用于少量血液采集且無需麻醉。剃毛后暴露采血點并用采血針刺入即可獲得血液樣本。

7. 頜下靜脈叢采血：快速、簡單且人性化的小鼠采血方法。通過面部進針點采集血液，將對動物的影響降到最低。

注意事項：

① 操作應迅速、輕柔以避免對動物造成不必要的傷害。

② 采血前后需進行適當?shù)闹寡胧┮苑乐钩鲅^多。

③ 尾尖在長期反復取血的情況下應逐漸向近心端穿刺。

④ 盡量在滿足實驗要求的基礎上選擇簡單易行且對動物傷害較小的采血方法。

處死方法

處死小鼠和大鼠時需遵循動物福利原則并確保操作規(guī)范。常用的處死方法包括頸椎脫臼法和二氧化碳窒息法等。

1. 頸椎脫臼法：先將大、小鼠麻醉后提起尾巴根部并放在粗糙面上固定枕寰關節(jié)。用力拉向后上方使枕寰關節(jié)脫臼導致脊髓與腦干斷離從而迅速死亡。此方法簡便易行且對動物傷害較小。

2. 二氧化碳窒息法：將小鼠或大鼠放入盛有二氧化碳氣體的密閉容器中通過替換氧氣達到窒息效果。需確保容器干凈透明并裝有通氣孔以及提供適應低氧環(huán)境的空氣或氧氣。持續(xù)增加CO?濃度直至達到100%并確保動物在引起疼痛之前已失去意識。給藥后觀察動物反應并確認死亡。此方法使用簡便、危害小且成本低廉但不適用于大型動物。

在進行以上所有操作時，務必確保人身和動物的安全，遵循動物福利原則并盡量減少對動物的傷害和痛苦。

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