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一心腦血管疾病動物模型

• （一）經(jīng)典模型

1.心肌梗死模型(MI,myocardial infarction)

2.大腦中動脈阻塞模型（MCAO,middle cerebral artery occlusion）

3.主動脈弓縮窄模型(transverse aoritc constriction)

4.動脈粥樣硬化模型（atherosclerosis）

• （二）心腦血管動物模型其他疾病模型

1.腹主動脈血管移植模型(AAVT,abdominal aortic vascular transplantation)

2.高脂血癥（HLP,hyperlipidaemia）

3.動靜脈內(nèi)瘺模型（arteriovenous）等

二心肌梗死模型

心肌梗死(myocardial infarction，MI)是一種嚴重的心血管疾病，由于冠狀動脈血供急劇減少或中斷，使心肌持續(xù)性缺血缺氧以致壞死，損害心功能且可能導致心律失常、休克以及心力衰竭等嚴重后果。

目前建立心肌梗死動物模型的方法有多種，包括：冠脈結扎法、藥物法、栓塞法、左室電灼法、液氮冷凍法等[1,2]。其中藥物法主要通過舌下靜脈注射垂體后葉素誘發(fā)血管痙攣促使心肌缺血梗死；后三種方法可直接形成冠脈閉塞，但對輔助設備要求高，操作難度大；冠狀動脈結扎法操作成熟簡便，梗阻部位明確易于判斷，既符合心梗發(fā)生的實際病理過程，又便于開展實驗研究，故主要采用此法建立心梗模型。

造模方法：冠狀動脈前降支結扎

觀察指標：心臟B超檢測 EF及左心室舒張末內(nèi)徑（LVEDD）和左室收縮末內(nèi)徑（LVESD）；Masson染色或天狼星紅染色觀察心肌組織纖維化情況，伊文思藍-TTC染色觀察梗死面積；HE染色觀察病理；ELISA檢測血清中的TNF-α、IL-1β及IL-6等炎癥因子。

三動脈粥樣硬化模型

動脈粥樣硬化（AS）是引起多種心血管疾病模型的病理生理基礎和主要原因，表現(xiàn)為大中型動脈中緩慢脂質(zhì)堆積形成斑塊，并伴有慢性炎癥反應。根據(jù)動物脂質(zhì)代謝情況、操作簡易程度，選擇轉基因小鼠作為建立動脈粥樣硬化模型的實驗動物較為理想。在建模過程中，可以考慮給予高脂高膽固醇飼料促進脂質(zhì)吸收，形成炎癥反應等影響動脈粥樣硬化形成的各種因素，尋求一種快速、方便、有效的模型建立方法。

觀察指標：體重，血脂四項，全主動脈大體油紅O染色，主動脈病理學檢查等

 部分實驗結果：

四腦梗模型

腦血管疾病目前已成為我國第一大致殘和第二大致死的疾病，全國每年 250 萬新發(fā)腦血管病例，其中腦梗塞高達 60%，因此，深入研究，減少后遺癥，已成為基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學的一個重要研究課題。腦梗后，內(nèi)源性炎癥過程立即上調(diào)，導致局部神經(jīng)炎癥和腦組織破壞加劇。最早在腦缺血后24小時觸發(fā)先天性免疫反應，隨后激活適應性免疫。這些免疫細胞共同產(chǎn)生許多炎癥介質(zhì)，即細胞因子、生長因子和趨化因子。

造模方法：線栓法（插線法）

觀察指標：TTC染色，Longa 神經(jīng)行為學評分5分制（1-3分，模型成功）；病理染色，ELISA檢測血清中的TNF-α、IL-1β及IL-6等炎癥因子。

神經(jīng)學行為評分（評分標準為5分制）

小鼠自由活動時身體會明顯向其右側方向側重傾斜，且會間斷性甚至持續(xù)右向側跌倒。（3分）靈賦拓普生物動物行為學平臺可進行大小鼠行為學測試，并有專業(yè)博士進行現(xiàn)場指導。

五其他模型

主動脈弓縮窄模型（transverse aortic constriction, TAC）最早由Rockman等于1991年正式建立，是慢性心室肥大最常用的疾病模型，用于模擬高血壓或室內(nèi)壓增高而引起的肥厚性心肌病、心衰。TAC術后，主動脈弓部定量的縮窄引起主動脈血流受阻，左心室壓力負荷增加，誘發(fā)了左心室的心室肥厚，早期以向心性肥厚為主，心功能可有效代償，隨著時間的延續(xù)，進行性發(fā)展為心腔的擴張，最終發(fā)展為心力衰竭。

根據(jù)動物品系、基因型和手術縮窄程度的不同，心室肥厚和心衰的進程不同。縮窄針通常由針頭制成。一般來說，使用27G的針頭（中度縮窄），TAC術后2周可發(fā)展為顯著性的心室肥厚，4-6周發(fā)展為心力衰竭；使用28G的針頭（重度縮窄），TAC術后1周可發(fā)展為顯著性的心室肥厚，2-3周發(fā)展為心力衰竭。

造模方法：

實驗鼠適應性飼養(yǎng)1周。術前禁食12 h(不禁水)。將實驗鼠放進連接好的麻醉機誘導箱進行麻醉。實驗鼠頸部至前胸手術區(qū)域常規(guī)備皮，碘伏消毒術區(qū)。頸、胸部正中開胸，鈍性分離肌肉，撐開器撐開切口，剝離胸腺、暴露主動脈弓部。

沿主動脈弓尋找無名動脈、左頸總動脈、左鎖骨下動脈，在右無名動脈與左頸總動脈兩者之間穿線，同時平行于主動脈弓上方放置縮窄用的針頭（根據(jù)實驗目的及實驗動物基因型的不同，綜合考慮并選擇縮窄的程度）并打結，將線扎緊后緩緩抽出用于縮窄的針頭，即在主動脈弓部形成定量縮窄。

關閉胸腔，將頸部和胸部的皮膚縫合，碘伏消毒。繼續(xù)通氣15 min。待大鼠恢復自主呼吸后，解除呼吸機供氣。術后連續(xù)3天肌肉注射青霉素殺菌抗感染。

模型評價

圖注：TAC造模前心電圖

圖注：TAC模型心電圖

圖注：模型前正常SD大鼠B超圖

圖注：TAC模型4周后心電圖

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