實(shí)驗(yàn)大、小鼠飼養(yǎng)指南來啦!
按微生物和寄生蟲控制的程度分類,可分為四類:
(1)普通動(dòng)物(Conventional Animals,CV):亦稱一級動(dòng)物,在微生物學(xué)控制上要求最低的動(dòng)物,它要求不攜帶人畜共患病和動(dòng)物烈性傳染病的病原,一般是在開放(普通)環(huán)境下飼養(yǎng)。因價(jià)格低,故教學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用之一。
(2)清潔動(dòng)物(Clean Animals,CL):亦稱二級動(dòng)物,除普通動(dòng)物應(yīng)排除的病原外,不攜帶對動(dòng)物危害大和對科學(xué)研究干擾大的病原,需要在溫度、濕度可控的屏障系統(tǒng)中驚醒飼養(yǎng)、繁殖或使用。
(3)無特殊病原體動(dòng)物(Specific Pathogen Free Animals,SPF):亦稱三級動(dòng)物,也就是我們常說的SPF級動(dòng)物。是指動(dòng)物體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在,但帶有非特定的微生物和寄生蟲的動(dòng)物。此類動(dòng)物應(yīng)排除一、二級動(dòng)物所排除的病原外,不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科研實(shí)驗(yàn)干擾大的病原,需要在屏障系統(tǒng)中驚醒保種、飼育及使用,按國家標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格實(shí)施微生物和寄生蟲控制。
(4)無菌動(dòng)物(Germ Free Animals,GF):是指在動(dòng)物體內(nèi)外的任何部位都檢不出一切生命體的動(dòng)物。這類動(dòng)物系在無菌條件下剖宮產(chǎn)出,需飼養(yǎng)在無菌、恒溫、恒濕的條件下,食品飲料等全部無菌。
01
設(shè) 施 環(huán) 境
01
溫度
小鼠臨界溫度為低溫10℃,高溫37℃。最適溫度為20~26℃,每日溫度不宜波動(dòng)太大。一般小鼠飼養(yǎng)盒內(nèi)溫度比環(huán)境高1~2℃。
02
濕度
飼養(yǎng)間相對濕度應(yīng)控制在40%~70%,最適相對濕度為50%~60%。一般小鼠飼養(yǎng)盒內(nèi)濕度比環(huán)境高5%~10%。
03
空氣清新度
通常以氨濃度作為動(dòng)物飼養(yǎng)間空氣清新度的指標(biāo),要求氨濃度不超過20ppm。以通風(fēng)換氣來控制飼養(yǎng)間的空氣清新,換氣次數(shù)根據(jù)飼養(yǎng)的動(dòng)物種類和飼養(yǎng)密度進(jìn)行調(diào)整,一般控制在10~20次/h,小鼠飼育籠旁氣流速度小于0.2m/s。
04
光照
小鼠適宜光線暗的環(huán)境,強(qiáng)光會對其正常生理活動(dòng)產(chǎn)生影響,尤其白化小鼠的視網(wǎng)膜在強(qiáng)光下會造成損傷。飼養(yǎng)間的光照強(qiáng)度以15~20lx為宜,明暗交替為12h/12h或10h/14h。
05
噪聲
小鼠喜歡安靜的環(huán)境,飼養(yǎng)間的噪聲應(yīng)控制在60dB以下。此外,超聲波對動(dòng)物的影響常常比人感受的要大,應(yīng)避免電器的蜂鳴、籠具與地面摩擦、腳輪的摩擦聲等。
06
籠具
宜用無毒塑料制成的透明或不透明的鼠盒,不銹鋼絲編制的籠蓋,飲水器為玻璃或塑料瓶,瓶塞上裝有可自動(dòng)吸水的金屬或玻璃飲水管?;\架一般可移動(dòng),主要采用不銹鋼材質(zhì)?;\具應(yīng)可經(jīng)受多種方法消毒滅菌。層流柜和獨(dú)立通風(fēng)籠具(IVC)是常用的小鼠飼養(yǎng)設(shè)備,這些設(shè)備通過高效過濾器可保持飼養(yǎng)籠盒內(nèi)空氣的凈化。
小鼠籠具的內(nèi)外邊角均應(yīng)圓滑、無銳口,每只小鼠所占籠具的最小面積和籠具高度要達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)的要求。
02
飼料、飲水和墊料
01
飼料
小鼠臨界溫度為低溫10℃,高溫37℃。最適溫度為小鼠飼喂配合飼料,要求必須保持營養(yǎng)物質(zhì)的平衡穩(wěn)定,富含蛋白質(zhì),否則會影響生長發(fā)育、生產(chǎn)繁殖和抵抗疾病的能力(尤其在斷奶時(shí)仔鼠死亡率高)。按照生長時(shí)期的不同,可分為生長料、繁殖料和維持料。成型飼料具一定的硬度,以便小鼠磨牙。為保障實(shí)驗(yàn)小鼠的微生物凈化,飼料應(yīng)用前需消毒滅菌。小鼠飼料的消毒滅菌主要有兩種方法,一種為預(yù)真空高壓滅菌,滅菌效果可靠,但是飼料的營養(yǎng)成分會有一定損耗。另一種是用60Co輻射滅菌,這種方法對營養(yǎng)成分的破壞很小,但成本相對較高。20~26℃,每日溫度不宜波動(dòng)太大。一般小鼠飼養(yǎng)盒內(nèi)溫度比環(huán)境高1~2℃。
02
飲水
實(shí)驗(yàn)小鼠的飲用水必須進(jìn)行消毒滅菌處理。常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲水機(jī)對動(dòng)物飲用水進(jìn)行過濾和消毒處理,也可用鹽酸將水酸化(pH 2.5~3.0),酸化水在一定程度上可抑制細(xì)菌生長。也可采用高壓鍋滅菌,效果更可靠。動(dòng)物飲用水應(yīng)定期進(jìn)行除菌效果監(jiān)測,監(jiān)測頻率應(yīng)不低于每月1次。
03
墊料
通常以氨濃度作為動(dòng)物飼養(yǎng)間空氣清新度的指標(biāo),要求氨濃度不超過20ppm。以通風(fēng)換氣來控制飼養(yǎng)間的空氣清新,換氣次數(shù)根據(jù)飼墊料應(yīng)選用吸濕性好、塵埃少、無異味、無毒性、無油脂的材料。常用的墊料有刨花、玉米芯、再生紙等。嚴(yán)禁使用針葉木(松、檜、杉)刨花作墊料,這類刨花發(fā)出具有芳香味的揮發(fā)性物質(zhì),影響藥理和毒理方面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。墊料需高壓滅菌或60Co輻照滅菌后方可使用。養(yǎng)的動(dòng)物種類和飼養(yǎng)密度進(jìn)行調(diào)整,一般控制在10~20次/h,小鼠飼育籠旁氣流速度小于0.2m/s。
03
飼養(yǎng)操作與日常管理
小鼠胃容量小,隨時(shí)采食,是多餐習(xí)性的動(dòng)物。飼養(yǎng)要求保障動(dòng)物隨時(shí)采食,一般每周添料3~4次。在小鼠大群飼養(yǎng)中,每周應(yīng)固定2天添加飼料,其他時(shí)間可根據(jù)情況隨時(shí)注意添加。動(dòng)物飲水同樣保障隨時(shí)飲用的需求。應(yīng)用飲水瓶飼喂時(shí), 由于會有飼料殘?jiān)谛∈箫嬎^程中進(jìn)入水瓶,因此,動(dòng)物飲水瓶要求每天清洗一次,每周消毒一次。
由于小鼠的飲食和排泄均在籠盒中進(jìn)行,因此,需要及時(shí)更換墊料以保持空氣的清新。但是,嚙齒類動(dòng)物自然領(lǐng)地的習(xí)性也需要保留一些排泄的余味,墊料的更換也不宜太頻繁。一般每周更換2次為宜。換墊料時(shí)將飼養(yǎng)盒一起移去,在專門的房間倒墊料,以防止室內(nèi)的灰塵和污染。
飼養(yǎng)和管理人員必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,并做好工作記錄,包括近交譜系圖、品系記錄、個(gè)體記錄、繁殖記錄、工作日志,以及飼養(yǎng)室溫度、濕度等,記錄應(yīng)妥善保存。
04
廢 物 處 理
小鼠生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)過程中會產(chǎn)生許多廢棄物,包括污水、廢棄墊料、一次性口罩、手套、帽子及動(dòng)物尸體等。必須按照相關(guān)要求進(jìn)行無害化處理,以達(dá)到不污染環(huán)境的目的。
01
污水的無害化處理
設(shè)施排出的污水應(yīng)首先集中在儲水池中進(jìn)行消毒。消毒方法使用最多的是化學(xué)處理。一是向污水中通以氯氣(1000~2000mg/L,作用2~6h),或是通以臭氧(100~750mg/L,作用30~90min),或者加熱法處理。一般認(rèn)為,加熱法較化學(xué)法更為可靠。污水消毒可加熱至95℃以上,作用不少于30min,然后才能排入市政下水管道。
02
普通固態(tài)廢棄物的無害化處理
將污染墊料、一次性口罩、手套、帽子等固態(tài)廢物由污染通道傳至外環(huán)境,及時(shí)裝進(jìn)垃圾袋中或?qū)S玫膲|料容器內(nèi),注意防蠅、防滲漏,并及時(shí)交付有資質(zhì)的環(huán)衛(wèi)公司進(jìn)行無害化處理。
03
空普通動(dòng)物尸體、
組織和銳器的處理氣清新度
動(dòng)物尸體裝入專用尸體袋中并存放于冰柜中待統(tǒng)一焚燒。針頭、玻璃、手術(shù)刀片放入銳器收集箱。一次性使用的注射器、輸液管等塑料制品,毀形后按有關(guān)要求統(tǒng)一進(jìn)行無害化處理。
04
特殊(感染及放射性)
廢棄物的處理
進(jìn)行感染和放射性實(shí)驗(yàn)所產(chǎn)生的廢棄物,必須按照國家有關(guān)法令進(jìn)行無害化處理,嚴(yán)禁作為普通廢棄物進(jìn)行一般處理。