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- 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
- 動(dòng)物飼養(yǎng) 疾病造模 行為學(xué)檢測(cè) 心功能 無創(chuàng)血壓 血常規(guī) 全自動(dòng)生化檢測(cè)等
- 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)
- CCK8/MTT 原代細(xì)胞分離 流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞劃痕 侵襲 遷移 EDU染色 轉(zhuǎn)染 穩(wěn)定株篩選
一文講清楚流式細(xì)胞術(shù)的原理與應(yīng)用
原創(chuàng) 康旭禾 康旭禾生物 2024年11月12日 19:00 江西
流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry,F(xiàn)CM)是一種高效的用于單細(xì)胞分析/分選的生物學(xué)技術(shù),其集細(xì)胞生物化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、電子技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等理論于一體。FCM能夠?qū)Υ罅康募?xì)胞或非細(xì)胞顆粒的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。
現(xiàn)代流式細(xì)胞儀自問世以來,已歷經(jīng)了40多年的發(fā)展,其被廣泛用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面,如:分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)、藥理學(xué)、植物學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)等眾多領(lǐng)域,在生物學(xué)研究領(lǐng)域中發(fā)揮不可或缺的作用。FCM具有高通量、多參數(shù)、速度快,采集數(shù)據(jù)量大、操作靈活等優(yōu)點(diǎn)。下面一起來了解下流式細(xì)胞術(shù)的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用及操作方法吧!
PART 01
流式細(xì)胞術(shù)原理
01
細(xì)胞檢測(cè)
細(xì)胞通過液流系統(tǒng)被引入流式細(xì)胞儀,其中包含鞘液(sheath)以保持細(xì)胞的穩(wěn)定流動(dòng)。
細(xì)胞被激光束照射,激光束會(huì)激發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生光信號(hào),包括前向散射光(FSC)和側(cè)向散射光(SSC)。
02
熒光檢測(cè)
細(xì)胞表面的抗原可以被特定的熒光抗體標(biāo)記。
激發(fā)熒光后,熒光信號(hào)被檢測(cè)器捕獲并轉(zhuǎn)換成電脈沖信號(hào)。
03
數(shù)據(jù)分析
電脈沖信號(hào)通過電子系統(tǒng)轉(zhuǎn)換成計(jì)算機(jī)可處理的數(shù)據(jù)。
通過專業(yè)的數(shù)據(jù)分析軟件,如FlowJo或Cytobank,可以生成細(xì)胞的詳細(xì)圖譜,包括細(xì)胞大小、熒光強(qiáng)度等信息。
PART 02
流式細(xì)胞術(shù)的6個(gè)應(yīng)用
流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry, FCM)是一種強(qiáng)大的技術(shù),能夠快速、準(zhǔn)確地分析單個(gè)細(xì)胞的特性。以下是流式細(xì)胞術(shù)的一些主要應(yīng)用:
01
細(xì)胞分選
具有特定特性的細(xì)胞可以通過流式細(xì)胞儀的分選功能被分離出來,用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)或研究。
流式細(xì)胞術(shù)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,特別是在免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)等研究中發(fā)揮著重要作用。通過這項(xiàng)技術(shù),科學(xué)家可以高效地分析細(xì)胞的各種參數(shù),如細(xì)胞表面標(biāo)記、細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)、細(xì)胞周期、DNA含量等,從而幫助理解細(xì)胞行為和疾病機(jī)制。
02
免疫狀態(tài)分析
通過流式細(xì)胞術(shù),可以對(duì)淋巴細(xì)胞及其亞群進(jìn)行詳細(xì)分析,幫助評(píng)估免疫系統(tǒng)的狀態(tài)。例如,在自身免疫性疾病、感染性疾病的治療中,監(jiān)測(cè)免疫細(xì)胞的數(shù)量和功能變化至關(guān)重要。
03
血液病診斷
流式細(xì)胞術(shù)可用于診斷各種血液疾病,如白血病、淋巴瘤等。通過檢測(cè)白血病細(xì)胞的特定免疫表型,可以輔助確定疾病類型和預(yù)后。
04
腫瘤研究
在腫瘤學(xué)研究中,流式細(xì)胞術(shù)用于分析腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性,評(píng)估腫瘤的生長(zhǎng)速度和對(duì)治療的反應(yīng)。此外,該技術(shù)還可以用于監(jiān)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。
05
藥物篩選和治療監(jiān)測(cè)
在藥物研發(fā)過程中,流式細(xì)胞術(shù)可用于篩選對(duì)藥物敏感的細(xì)胞群體,加速新藥的開發(fā)和上市。同時(shí),在藥物治療過程中,通過監(jiān)測(cè)患者細(xì)胞的變化,可以及時(shí)調(diào)整治療方案。
06
遺傳學(xué)和血液學(xué)研究
流式細(xì)胞術(shù)還可以用于分析血液樣本中的遺傳標(biāo)記,如DNA、RNA和蛋白質(zhì),為血液疾病的遺傳學(xué)診斷和個(gè)性化治療提供依據(jù)。
總之,流式細(xì)胞術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床實(shí)踐中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,其應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)展,為疾病的早期診斷、治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估提供了強(qiáng)有力的工具。
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主營(yíng)項(xiàng)目
1
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等
2
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株
3
分子生物學(xué)
PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長(zhǎng)度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等
4
蛋白實(shí)驗(yàn)
WB、Co-IP、酵母雙雜
5
病理實(shí)驗(yàn)
HE染色、免疫組學(xué)、電鏡
6
生理生化實(shí)驗(yàn)
肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。
7
多組學(xué)實(shí)驗(yàn)
基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析
8
整體課題實(shí)驗(yàn)
方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤(rùn)色、協(xié)助投稿
END
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