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許多剛開始接觸動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的小伙伴可能都會(huì)有點(diǎn)迷茫，不知道怎么給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組，要分幾組、每組要幾只動(dòng)物，怎么分配。別擔(dān)心，今天的文章就來給你一一解答。

我們要分幾組？

做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們會(huì)設(shè)置不同的實(shí)驗(yàn)小組。怎么分組、每組多少動(dòng)物，這些都直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度和統(tǒng)計(jì)分析。所以，設(shè)置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組是非常重要的一步。

一般來說，我們可以分為自身對(duì)照組、平行對(duì)照組。平行對(duì)照組又可以細(xì)分為正對(duì)照組和負(fù)對(duì)照組（也就是空白對(duì)照組）。

自身對(duì)照組：就是比較動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前后的數(shù)據(jù)。

正對(duì)照組：和自身對(duì)照組做相同的操作，但不包括我們要研究的那個(gè)因子（比如治療的藥物、給藥的方法或部位）。

負(fù)對(duì)照組（空白對(duì)照）：什么操作都不做。

另外，還有一種常用的3組對(duì)照分組法：

設(shè)置空白對(duì)照（負(fù)對(duì)照）組、模型對(duì)照（正對(duì)照）組、陽(yáng)性對(duì)照組。

模型對(duì)照組：對(duì)疾病模型動(dòng)物做陰性處理（比如用溶劑或賦形劑）。

陽(yáng)性對(duì)照組：對(duì)疾病模型動(dòng)物用有效的藥物治療（或其他已知的有效處理）。

設(shè)計(jì)3個(gè)或以上的計(jì)量梯度。最終得到的分組如下：

分組的時(shí)候，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況靈活調(diào)整。比如，如果實(shí)驗(yàn)中不需要疾病模型，那就可以去掉模型對(duì)照組；如果實(shí)驗(yàn)里沒有陽(yáng)性藥，那就可以不設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組。

每組要幾只動(dòng)物？

樣本量并不是越大越好。樣本量大不僅實(shí)驗(yàn)操作難度會(huì)增大，還會(huì)浪費(fèi)實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)，無(wú)法嚴(yán)格把控實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，也違反了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的“3R原則”（替代、減少、優(yōu)化）。但是，樣本量過少也可能導(dǎo)致最終數(shù)據(jù)沒有差異，出現(xiàn)陰性結(jié)論，這樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果就不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和說服性。

確定每組動(dòng)物數(shù)量的方法有幾種：

第一種：最簡(jiǎn)單、適用范圍最廣的方法

在滿足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3R原則和統(tǒng)計(jì)學(xué)的前提下，每組至少6個(gè)樣本量。其中，實(shí)驗(yàn)小鼠每組至少10只，大鼠每組6只，體型更大的動(dòng)物每組樣本量可以適當(dāng)減少1~2只。

第二種：自由度（E）估算

自由度是方差分析中的重要指標(biāo)。當(dāng)E＜10時(shí)，表示樣本量過?。划?dāng)10≤E≤20時(shí)，表示樣本量是正常值；當(dāng)E＞20時(shí)，表示樣本量過大。

第三種：嚴(yán)格計(jì)算樣本量

如果對(duì)實(shí)驗(yàn)中的樣本量要求非常嚴(yán)格，可以使用更復(fù)雜的公式來計(jì)算。

當(dāng)基于兩組均數(shù)計(jì)算樣本量時(shí)，計(jì)算公式如下：

多組均數(shù)計(jì)算樣本量時(shí)，計(jì)算公式如下：

上面三種方法中，后兩種方法更偏向于臨床研究使用，因?yàn)樾枰紤]人群中的個(gè)體差異。但我們使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系純化度高、個(gè)體差異小，所以大多數(shù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不必考慮個(gè)體差異因素的影響，可以直接參考第一個(gè)方法。同時(shí)，也可以多查閱文獻(xiàn)和咨詢有經(jīng)驗(yàn)的小伙伴。

特別注意：如果實(shí)驗(yàn)中有損耗（比如動(dòng)物死亡等原因），最好在正常的樣本量基礎(chǔ)上加上可供損耗數(shù)量的樣本量。

怎么分配實(shí)驗(yàn)動(dòng)物？

為了減少個(gè)體間的差異，保證最終實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性，建議采用隨機(jī)分配的方法。分配方法要根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c對(duì)象來確定。常見的方法有：

1. 完全隨機(jī)設(shè)計(jì)：將動(dòng)物逐一編號(hào)，然后使用隨機(jī)數(shù)表將動(dòng)物分組。這個(gè)方法適用于個(gè)體之間差異較小的動(dòng)物。

2. 隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)：將所有的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為幾個(gè)區(qū)組（建議區(qū)組數(shù)量＞3），區(qū)組中的樣本數(shù)量控制在區(qū)組數(shù)的2倍及以上。之后將每區(qū)組的動(dòng)物依照完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分配至各個(gè)實(shí)驗(yàn)分組中。這個(gè)方法適用于個(gè)體間差異較大的動(dòng)物。

如有實(shí)驗(yàn)技術(shù)問題，可咨詢我們

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主營(yíng)項(xiàng)目

1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無(wú)創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等

2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株

3. 分子生物學(xué)

PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長(zhǎng)度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等

4. 蛋白實(shí)驗(yàn)

WB、Co-IP、酵母雙雜

5. 病理實(shí)驗(yàn)

HE染色、免疫組學(xué)、電鏡

6. 生理生化實(shí)驗(yàn)

肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。

7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析

8. 整體課題實(shí)驗(yàn)

方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤(rùn)色、協(xié)助投稿

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