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"細(xì)胞-細(xì)胞間交互"三種常見作用方式和研究方法盤點(diǎn)，還不趕快收藏！

以外泌體（或者胞外囊泡）及其成分（如RNA、脂質(zhì)和蛋白）、線粒體轉(zhuǎn)移（比如隧道納米管介導(dǎo)的）、配體-受體（比如膜配體、分泌性配體以及膜受體）為代表的“細(xì)胞-細(xì)胞間通訊（Cell-Cell Communication，CCC）”是很多研究團(tuán)隊(duì)關(guān)注的主題，也是這幾年國(guó)自然項(xiàng)目和高分文章經(jīng)常關(guān)注的領(lǐng)域。今天來(lái)盤點(diǎn)這三種作用方式的研究方法。 01外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊外泌體是細(xì)胞分泌的納米級(jí)囊泡，攜帶蛋白質(zhì)、RNA等生物分子，通過(guò)與受體細(xì)胞融合或被內(nèi)吞，傳遞信號(hào)調(diào)節(jié)其功能。研 究 方 法（1）外…

WB條帶出現(xiàn)各種狀況? 原因分析和解決方法在這里！

Western Blot雖是實(shí)驗(yàn)室最常用的蛋白分析技術(shù)，但是由于它步驟繁瑣、操作流程長(zhǎng)、影響因素多，所以，導(dǎo)致我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)遇到各式各樣的問(wèn)題。今天我們總結(jié)了一些WB實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常遇到的各種“奇葩”條帶問(wèn)題，并為你推薦了常用的解決方法，希望對(duì)大家有所幫助。一、目標(biāo)條帶沒(méi)有信號(hào)原因分析： 樣品中可能含有蛋白酶，使蛋白樣品分解成小分子。解決方法： 添加蛋白酶抑制劑。原因分析： 目標(biāo)蛋白濃度過(guò)低（低于檢測(cè)下線）。力 解決方法：加大上樣量或提高目標(biāo)蛋白濃度。 原因分析：…

動(dòng)物實(shí)驗(yàn) | 裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)反反復(fù)復(fù)？速看這個(gè)裸鼠成瘤小技巧，學(xué)會(huì)不再是難題！

裸鼠，也被稱為無(wú)胸腺裸鼠，是一種先天性胸腺缺陷的突變小鼠，其形成源于第VIII連鎖群內(nèi)裸體位點(diǎn)基因的純合。裸鼠在科學(xué)研究中展現(xiàn)出巨大的潛力，這主要?dú)w功于其nu基因獨(dú)特的遺傳特性。經(jīng)過(guò)全球?qū)嶒?yàn)動(dòng)物遺傳育種學(xué)家的不懈努力，nu基因已被成功導(dǎo)入不同近交系動(dòng)物中，從而創(chuàng)建了一系列動(dòng)物模型。僅小鼠模型一種，就已建立了二十余種近交系裸鼠。這些裸鼠具有不同的遺傳背景和nu基因的遺傳特性，為醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究者提供了一種極其寶貴的試驗(yàn)材料。本文將重點(diǎn)探討裸鼠的成瘤實(shí)驗(yàn)方法。常…

流式細(xì)胞術(shù) ：當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)

流式細(xì)胞術(shù) (Flow Cytometry, FCM) 是一種在液流中快速檢測(cè)細(xì)胞特性的技術(shù)，是當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一。它通過(guò)將單個(gè)細(xì)胞與特異性抗體結(jié)合，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)定量分析，包括細(xì)胞表面標(biāo)記、細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)、細(xì)胞周期、DNA含量等。流式細(xì)胞術(shù)具有高通量、高靈敏度、高特異性等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)等領(lǐng)域。01流式細(xì)胞術(shù)原理一、分析型流式細(xì)胞儀檢測(cè)原理將待測(cè)樣品制成單細(xì)胞懸液，在鞘液的包裹下進(jìn)入流式細(xì)胞儀內(nèi)的檢測(cè)區(qū)域，細(xì)胞在激光的照射下會(huì)發(fā)生散…

qPCR原理雖懂，但數(shù)據(jù)難分析，你真的會(huì)設(shè)計(jì)qPCR實(shí)驗(yàn)方案嗎？

一、qPCR 實(shí)驗(yàn)前期籌備（一）RNA模板要求實(shí)驗(yàn)啟動(dòng)前，需確保RNA模板的純度、濃度及完整性均符合標(biāo)準(zhǔn)，方可推進(jìn)后續(xù)步驟。具體要求如下：①RNA需保持一級(jí)結(jié)構(gòu)完好無(wú)損。②高純度：無(wú)DNA、游離核苷酸等核酸雜質(zhì)；無(wú)酶抑制性有機(jī)溶劑、金屬離子及蛋白質(zhì)、多糖、脂類等污染物。③足夠濃度：需滿足反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)的基本需求。（二）qPCR引物設(shè)計(jì)規(guī)范引物建議長(zhǎng)度介于18~30個(gè)堿基；GC含量應(yīng)控制在40%~60%之間；設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)跨越內(nèi)含子，避免內(nèi)部出現(xiàn)互補(bǔ)序列。通常，引物終濃度設(shè)為0.2μM效果較佳；若…

國(guó)自然實(shí)驗(yàn)外包：有什么好處，選擇與注意事項(xiàng)

現(xiàn)如今，眾多科研人員已經(jīng)認(rèn)同實(shí)驗(yàn)外包這個(gè)行業(yè)，并融入其中，是國(guó)家鼓勵(lì)資源合理利用的很好方向。國(guó)自然實(shí)驗(yàn)外包：有什么好處，選擇與注意事項(xiàng)。一般事先跟你講實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)的，都是比較靠譜的公司，因?yàn)檫@些公司都曾經(jīng)遇到過(guò)很多問(wèn)題，知道你的實(shí)驗(yàn)?zāi)睦锟赡艹霈F(xiàn)問(wèn)題。如果滿嘴跑火車，說(shuō)實(shí)驗(yàn)肯定可以做好，這樣的公司可能就是皮包公司，因?yàn)樗恢揽蒲胁皇墙^對(duì)的，不知道哪里可能出現(xiàn)問(wèn)題。一定要與管實(shí)驗(yàn)的技術(shù)聯(lián)系上，銷售員、業(yè)務(wù)代表等都是不做實(shí)驗(yàn)的，實(shí)驗(yàn)做得好不好，是否及時(shí)都…

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（小鼠與大鼠）的操作指南！

性別區(qū)分在實(shí)驗(yàn)操作中，準(zhǔn)確區(qū)分小鼠和大鼠的性別至關(guān)重要。主要依據(jù)以下特征進(jìn)行判斷：1. 生殖器與肛門的距離：雄性小鼠和大鼠的生殖器與肛門距離較遠(yuǎn)，而雌性則較近。這一特征在幼齡仔鼠中尤為明顯，因?yàn)榇藭r(shí)它們的外生殖器尚未成熟。2. 毛發(fā)覆蓋情況：雄性小鼠和大鼠在生殖器與肛門之間通常有毛發(fā)生長(zhǎng)，形成一條明顯的毛帶；而雌性則無(wú)毛，呈現(xiàn)一條清晰的縱溝。3. 乳頭的明顯程度：雌性小鼠和大鼠的乳頭相較于雄性更為突出和明顯。4. 生殖器官特征：雄性陰莖朝向頭部方向突出，可通…

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)干貨 | 常用的細(xì)胞活性檢測(cè)方法有哪些？

在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究中，驗(yàn)證細(xì)胞活性是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，它關(guān)乎著細(xì)胞在特定條件下（例如藥物處理、放射性或紫外線照射、培養(yǎng)條件調(diào)整等）的生長(zhǎng)狀態(tài)。細(xì)胞活性不僅是評(píng)估細(xì)胞健康的關(guān)鍵指標(biāo)，也是眾多科研活動(dòng)的基石。為此，活細(xì)胞分析技術(shù)日益凸顯其重要性。細(xì)胞活性的檢測(cè)方法眾多，其中包括臺(tái)盼藍(lán)染色法、熒光染色法、克?。洌┬纬煞?、ATP含量測(cè)定法以及比色法等。以下是對(duì)幾種常用方法的詳細(xì)介紹：No.1染色計(jì)數(shù)法01化學(xué)染色法 化學(xué)染色法中的染色計(jì)數(shù)法是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中用于檢查細(xì)…

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物知識(shí) | 為什么6-8周的小鼠更受歡迎？

為何6-8周齡小鼠成為實(shí)驗(yàn)首選？做過(guò)小鼠實(shí)驗(yàn)的同學(xué)們或許都有這樣的疑惑......以下是小鼠出生后至14天的日形態(tài)變化概覽，可見小鼠驚人的生長(zhǎng)速度，僅兩周（14天）便已初具形態(tài)。與人類相比，小鼠的壽命僅為約24個(gè)月，相當(dāng)于人類的全球平均壽命80歲。通過(guò)換算，我們得出小鼠生活1天約等于人類40天，即人類1年約等于小鼠9.125天（計(jì)算公式：(80歲×365天) ÷ (2年×365天)）。但需注意，小鼠與人類的成熟及衰老速率并不成線性比例，因此這種換算僅為大致對(duì)應(yīng)，具體年齡關(guān)系更為復(fù)雜（參考…

我?guī)熃阋荒?篇SCI，全靠這20個(gè)“寶藏網(wǎng)站”，太實(shí)用了

這20個(gè)寶藏網(wǎng)站，科研路上必備！精心篩選自100個(gè)科研資源，涵蓋SCI文獻(xiàn)檢索、高效閱讀、論文撰寫、科研繪圖等，讓你一旦接觸便難以割舍，科研之旅因此更加順暢。請(qǐng)耐心閱讀，尤其是末尾6款科研繪圖神器，絕對(duì)不容錯(cuò)過(guò)。（閱讀完畢別忘了收藏點(diǎn)贊哦，避免未來(lái)迷失方向）一、文獻(xiàn)檢索篇01 PubMed鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/由美國(guó)國(guó)立醫(yī)學(xué)圖書館NCBI打造，生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域權(quán)威檢索系統(tǒng)，收錄自1966年起，70余國(guó)4000余種期刊文獻(xiàn)，科研人必備。搭配Scholarscope、EasyPubMed等插…

細(xì)胞實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染操作步驟及影響因素

細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是一種常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，用于將外源DNA或RNA導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，從而研究基因的表達(dá)、功能和調(diào)控機(jī)制。以下是細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的一般步驟和注意事項(xiàng)。一、細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的一般步驟01細(xì)胞培養(yǎng) ? 提前一天鋪板，確保細(xì)胞均勻分布。轉(zhuǎn)染前將細(xì)胞培養(yǎng)至70-80%的密度，以保證細(xì)胞處于活躍的生長(zhǎng)狀態(tài)。02轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒準(zhǔn)備 ? 根據(jù)轉(zhuǎn)染試劑的說(shuō)明書準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒DNA。轉(zhuǎn)染試劑的用量通常根據(jù)細(xì)胞類型和轉(zhuǎn)染效率來(lái)確定，一般為2-10μL/孔（對(duì)于24孔板）。質(zhì)粒DNA的用量通常為…

免疫熒光染色之抗體挑選全攻略

免疫熒光染色技術(shù)依賴于抗原抗體相互作用的極高特異性。通過(guò)將不影響抗原抗體功能的熒光染料標(biāo)記在抗體或抗原上，當(dāng)標(biāo)記的抗體與其對(duì)應(yīng)的抗原特異性結(jié)合時(shí)，可在熒光顯微鏡下觀測(cè)到一種特異的熒光信號(hào)，從而判定抗原的存在、散布和位置。今天，小編將與大家探討免疫熒光染色中抗體的選擇方法，希望能對(duì)大家有所幫助。免疫熒光染色一抗的挑選①依據(jù)樣本挑選一抗一抗的物種來(lái)源應(yīng)盡量避免與檢測(cè)樣本的物種相同，以防止二抗與樣本內(nèi)生的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。例如，若檢測(cè)的是小鼠樣本…

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?| 糖尿病動(dòng)物模型方法大匯總

糖尿?。╠iabetes mellitus, DM）已對(duì)全球人類健康構(gòu)成重大威脅。DM及其并發(fā)癥不僅顯著降低患者生活質(zhì)量，還是導(dǎo)致殘疾和死亡的關(guān)鍵因素。因此，構(gòu)建恰當(dāng)?shù)奶悄虿?dòng)物模型，以深入探究DM及其并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)理，顯得至關(guān)重要。當(dāng)前，制備DM動(dòng)物模型的主要方法包括：胰腺切除術(shù)、化學(xué)藥物誘導(dǎo)、利用自發(fā)性糖尿病動(dòng)物及轉(zhuǎn)基因技術(shù)等。一、胰腺切除法制備DM模型常選用狗、貓及大鼠等動(dòng)物，通過(guò)全部或近乎全部切除其胰腺（同時(shí)保留胰十二指腸動(dòng)脈吻合弓）。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物連續(xù)兩日血糖濃度超過(guò)1…

技術(shù)貼 |畢業(yè)論文寫作的方法與技巧

快畢業(yè)啦！?。〈蠹艺撐亩紝懥藛?？科研論文是反映科研成果和科研能力的一類學(xué)術(shù)性文章。從研究背景對(duì)象，到提出問(wèn)題、研究方法、得出的結(jié)論，以及作者綜合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和其他資料分析得出的新的見解。No.1寫作步驟01 前期準(zhǔn)備 （1）收集和篩選相關(guān)資料。要對(duì)閱讀的文獻(xiàn)進(jìn)行區(qū)分，分為需要精讀和泛讀的文章。與自己研究主題密切相關(guān)的文獻(xiàn)應(yīng)當(dāng)反復(fù)仔細(xì)閱讀；與研究主題關(guān)聯(lián)程度小的文章則彩英瀏覽和區(qū)別閱讀的方法。還需注意年代，一般先了解3~5年內(nèi)的文獻(xiàn)。（2）充分了解相關(guān)研究背景后，根…

當(dāng)審稿人要求補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)，我們應(yīng)該怎么辦？

在SCI論文的評(píng)審流程中，審稿人提議增添實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)是屢見不鮮的環(huán)節(jié)。面對(duì)這一情形，作者往往面臨兩種策略：實(shí)施額外實(shí)驗(yàn)或維持原狀。這兩種路徑各有其利弊，需依據(jù)實(shí)驗(yàn)的可行性、研究的核心目標(biāo)及論文的整體布局來(lái)謹(jǐn)慎抉擇。01選擇實(shí)施額外實(shí)驗(yàn)當(dāng)審稿人建議增加實(shí)驗(yàn)時(shí)，其初衷往往在于通過(guò)更詳盡的數(shù)據(jù)支撐或?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證來(lái)提升研究的精確度和說(shuō)服力。若你傾向于采納此建議，需考量以下幾個(gè)維度： ? 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的預(yù)期價(jià)值：額外實(shí)驗(yàn)的結(jié)果充滿未知，但理想狀況下，它能強(qiáng)化原有研究結(jié)論，為…

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選---抗生素如何選？

在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，基因轉(zhuǎn)染是一種常見的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，用于將外源基因?qū)爰?xì)胞中。然而，要想成功地進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染并篩選出陽(yáng)性細(xì)胞株，選擇合適的篩選抗生素至關(guān)重要。本文將詳細(xì)介紹如何選擇穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的篩選抗生素。通常構(gòu)建的載體上有兩個(gè)抗性基因，如，氨芐青霉素（Amp）和、新霉素抗性基因(neo)。那么建立穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系時(shí)該用哪種抗生素來(lái)篩細(xì)胞呢？很多真核表達(dá)質(zhì)粒上都有兩個(gè)抗性基因，但一般其中只有一個(gè)抗性可以用來(lái)篩細(xì)胞。其中氨芐青霉素對(duì)細(xì)胞是沒(méi)有篩選作用的，這是用于構(gòu)建克隆時(shí)篩…

【科研干貨】各類體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)合集詳解！

體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)是我們開展課題研究及進(jìn)行生物醫(yī)藥醫(yī)學(xué)研究非常重要的途徑。今天整理了多種體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的干貨共大家學(xué)習(xí)和參考：MPC5足細(xì)胞缺氧模型、脊索樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化成髓核樣細(xì)胞、人誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞(hiPSC)誘導(dǎo)分化成脊索樣細(xì)胞、大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)模型、3T3-L1細(xì)胞成脂誘導(dǎo)模型、乳鼠二型肺泡上皮細(xì)胞(AECII)分離提取。LPS誘導(dǎo)細(xì)胞炎癥模型1. 實(shí)驗(yàn)背景脂多糖(Lipopolysaccharide)(英文簡(jiǎn)寫LPS)是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外壁的組成成分，是由脂質(zhì)和多糖構(gòu)成的物質(zhì)(糖脂質(zhì)…

HE染色過(guò)程中常見問(wèn)題分析及解決對(duì)策

蘇木精-伊紅染色法（HE染色法），作為石蠟切片技術(shù)中的經(jīng)典染色方法，廣泛應(yīng)用于組織學(xué)、胚胎學(xué)及病理學(xué)的教學(xué)與科研中。該方法利用堿性的蘇木精使細(xì)胞核及胞質(zhì)核酸呈現(xiàn)紫藍(lán)色，而酸性的伊紅則讓細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞外基質(zhì)染上紅色。常見問(wèn)題及解決方案一、著色異常（過(guò)深或過(guò)淺）著色不當(dāng)常因染色時(shí)間控制不當(dāng)所致。HE染色需借助鏡檢來(lái)精確控制時(shí)間，預(yù)實(shí)驗(yàn)可幫助確定最佳染色時(shí)長(zhǎng)。通常，新鮮蘇木素的染色時(shí)間約為1-3分鐘，分化時(shí)間亦需適中，過(guò)度分化后可通過(guò)水洗并復(fù)染蘇木素來(lái)調(diào)整。二、…

做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，我們要分幾組？每組要幾只動(dòng)物？怎么分配動(dòng)物？一文全解答！

許多剛開始接觸動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的小伙伴可能都會(huì)有點(diǎn)迷茫，不知道怎么給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組，要分幾組、每組要幾只動(dòng)物，怎么分配。別擔(dān)心，今天的文章就來(lái)給你一一解答。我們要分幾組？做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們會(huì)設(shè)置不同的實(shí)驗(yàn)小組。怎么分組、每組多少動(dòng)物，這些都直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度和統(tǒng)計(jì)分析。所以，設(shè)置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組是非常重要的一步。一般來(lái)說(shuō)，我們可以分為自身對(duì)照組、平行對(duì)照組。平行對(duì)照組又可以細(xì)分為正對(duì)照組和負(fù)對(duì)照組（也就是空白對(duì)照組）。自身對(duì)照組：就是比較動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前后的…

2025 國(guó)自然：最具潛力科研熱點(diǎn)評(píng)選——獨(dú)木橋太難擠，另辟蹊徑也不錯(cuò)

眾所周知，國(guó)自然看重創(chuàng)新，因此那些引領(lǐng)潮流、極具創(chuàng)新性的前沿項(xiàng)目更能吸引研究者的目光。然而有一些研究方向雖然不是最炙手可熱的焦點(diǎn)，卻蘊(yùn)含著巨大潛力，默默貢獻(xiàn)著重要價(jià)值，有著深厚的科學(xué)基礎(chǔ)和廣闊的應(yīng)用前景。這些熱點(diǎn)可能涉及細(xì)胞層面的精細(xì)分析、疾病發(fā)生機(jī)制的深入研究、新技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用等多個(gè)方面。它們有望為解決當(dāng)前醫(yī)學(xué)難題提供新的思路和方法，推動(dòng)醫(yī)學(xué)科研不斷向前發(fā)展。通過(guò)對(duì)這些潛力熱點(diǎn)的評(píng)選和分析，我們可以更好地把握醫(yī)學(xué)科研的未來(lái)趨勢(shì)，為科研工作者…